揄宸

一、纯化（去除小片段）： 二、测序扩增反应： 三、沉淀： 四、变性：

一、标准体系：(1pmol/μl=1μM) 二、实验中配置的体系：10μl 三、PCR程序： 四、影响

1. 取血样500μl置于2ml离心管中，加入1000μl裂解液（GUSCN-lysis），再加入100μl硅胶，振摇片刻，静置30min；

注意：硅胶在使用前，要强烈振摇，使之颗粒均匀

          静置期间，振摇数次，5min/次

2. 上述离心管离心：8000rpm，30sec，弃上清

3. 上述离心管，加入1000μl洗涤液（GUSCN-washing），离心：8000rpm，30sec，弃上清；重复一次

4. 上述离心管，加入1000μl75%乙醇，离心：8000rpm，1min，弃上清；重复一次

5. 上述离心管，加入1000μl丙酮，离心：8000rpm，1min，弃上清，烘干10min

DNA分子在碱性缓冲液中带负电荷，在外加电场作用下向正极泳动。DNA分子在琼脂糖凝胶中泳动时，有电荷效应与分子筛效应。不同DNA的分子量大小及构型不同，电泳时 的泳动率就不同，从而分出不同的区带。 溴化乙锭（EB）为扁平状分子，在紫外光照射下发射荧光。EB可与DNA分子形成EB-DNA复合物，其荧光强度与DNA的含量成正比。据此可粗略估计样品DNA浓度。

基因组DNA的提取通常用于构建基因组文库、Southern杂交(包括RFLP)及PCR分离基因等。利用基因组DNA较长的特性,可以将其与细胞器或质粒等小分子DNA分离。在提取过程中,染色体会发生机械断裂,产生大小不同的片段,因此分离基因组DNA时应尽量在温和的条件下操作,如尽量减少酚/氯仿抽提、混匀过程要轻缓, 以保证得到较长的DNA。